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1640液体培养基的配制方法说明
点击次数:378 发布时间:2018-09-19
   1640液体培养基( liquid culture medium),固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。

  1640液体培养基的配制方法说明:

  1.配料

  配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水调成糊状

  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边

  加热边搅拌以防止烧焦。

  3.调PH

  用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。

  4.过滤

  滤纸或棉花进行过滤。

  5.分装

  一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

  (1)三角瓶

  若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,多不能超过150 ml培养基/250 ml的

  三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250

  ml的三角瓶,保证通气良好。

  (2)试管分装

  液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;

  固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。

  6.包扎

  分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

  7.灭菌

  按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

  基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

  8.摆斜面

  灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

  9.贮存

  培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用

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